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甘薯IbSSI基因啟動子序列的克隆及瞬時表達分析

作者:王雁楠; 楊育峰; 楊國紅; 張莉; 陳獻功; 徐心志; 劉慶昌; 翟紅; 何紹貞 河南省農業科學院糧食作物研究所; 鄭州450002; 中國農業大學; 農業農村部甘薯生物學與生物技術重點實驗室; 北京100193

摘要:植物可溶性淀粉合成酶(soluble starch synthase, SS)在植物支鏈淀粉的合成中起著關鍵作用,其主要負責支鏈的延伸。前期我們從甘薯中克隆到IbSSI基因并對其進行了表達分析及功能驗證,發現該基因在甘薯中的表達受到外源蔗糖的誘導以及晝夜節律的調控。本研究在此基礎上利用染色體步移法克隆到IbSSI基因1 811 bp的啟動子序列。PlantCARE在線分析表明IbSSI啟動子序列富含TATA-box和CAAT-box兩個基本元件,還含有與晝夜節律、光照、蔗糖、逆境響應及組織特異表達等相關的順式作用元件。將IbSSI基因全長啟動子及其6個啟動子5’端缺失片段分別替換植物表達載體pBI121的CaMV 35S啟動子并在本生煙草(Nicotiana benthamiana)葉片中進行瞬時表達。GUS染色結果表明不同長度片段的啟動子驅動β-葡萄糖醛酸酶基因(GUS)表達的能力有所差異,其中-200 bp~-369 bp區段以及-1 015 bp~-1 304 bp區段可能存在著增強轉錄的重要順式作用元件。本研究揭示了IbSSI基因受外源蔗糖誘導表達及晝夜節律調控的原因,并為進一步闡明IbSSI基因在甘薯淀粉生物合成中的作用提供了科學依據。

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