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外源性IFN-β對OL細胞和OL/BDV細胞中內源性Ⅰ型IFN的誘導作用

作者:翟愛霞; 顏冬梅; 王海萍; 崔樂樂; 卜桐; 考文萍; 張鳳民 哈爾濱醫科大學微生物學教研室伍連德研究所、黑龍江省感染與免疫重點實驗室、黑龍江省普通高校病原生物學重點實驗室、黑龍江省普通高校感染與免疫科技創新團隊; 哈爾濱150081; 哈爾濱醫科大學附屬第四醫院; 150001

摘要:目的探討外源性干擾素(interferon,IFN)-β對人類少突膠質細胞(oligodendrocyte,OL)和博爾納病病毒(Borna disease virus,BDV)持續感染的OL細胞(OL/BDV)中內源性Ⅰ型IFN表達和干擾素調節因子(interferon regulatory factor,IRF)7細胞定位的影響。方法外源性IFN-β處理OL細胞和OL/BDV細胞0、0.5、2、4、8、24 h,根據細胞是否加入外源性IFN-β,分為外源性IFN-β未刺激組和刺激組。采用實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)檢測Ⅰ型IFN mRNA表達。OL細胞和OL/BDV細胞分別轉染IRF7-EGFP質粒,外源性IFN-β刺激4 h,觀察IRF7細胞定位情況。結果外源性IFN-β刺激OL細胞,在2、4、24 h,IFN-αmRNA表達顯著增加(P值分別為0.008,0.0001,0.004);在0.5、4、8、24 h,IFN-βmRNA表達顯著增加(P值分別為0.0004,0.0002,0.011,0.012),兩者均在4 h增加最為顯著。外源性IFN-β刺激OL/BDV細胞4 h和24 h,IFN-αmRNA表達顯著增加(P值分別為0.0004,0.022),IFN-βmRNA表達僅在刺激4增加(P=0.002)。外源性IFN-β刺激OL細胞和OL/BDV細胞4 h,IRF7綠色熒光蛋白均轉移至細胞核內。結論外源性IFN-β可誘導OL細胞和OL/BDV細胞中內源性I型IFN表達,參與解除BDV對I型IFN應答的抑制過程,并促進IRF7的活化入核。

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