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酶解法分離與同源血清培養SD大鼠胃Cajal間質細胞的實驗研究

作者:寧海恩 凌江紅 張智 王煜姣 上官鑫超 廣西醫科大學第一附屬醫院 廣西南寧530021

摘要:[目的]探討體外酶解法分離、同源血清培養SD大鼠胃Cajal間質細胞(ICC)的實驗方法。[方法]無菌條件下分離大鼠胃竇組織,酶解法分離制備ICC細胞懸液,接種于M199完全培養基(含10%大鼠同源血清,不含胎牛血清及重組鼠類干細胞因子)進行培養,倒置顯微鏡下觀察細胞形態變化,適時換液,MTT法測定ICC對數生長曲線,C-kit特異性抗體免疫熒光染色法鑒定ICC,并取對數生長期細胞進行傳代培養。[結果]同源血清培養ICC成活并體現其特有的生長曲線及形態學特征,C-kit特異性抗體免疫熒光染色證實細胞為ICC,且細胞傳代培養成功。[結論]酶解法可以對SD大鼠胃竇ICC進行分離,在不使用胎牛血清(FBS)及重組鼠類干細胞因子(SCF)培養的條件下,含大鼠同源血清的M199完全培養基可以完成ICC原代培養及傳代培養。該項培養方法可行,為研究ICC生物學特性及其與胃腸病學的臨床和基礎關系奠定基礎。

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廣西中醫學院學報

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