摘要:本研究利用響應面法優化重組大腸桿菌的培養基提高了其表達丙酮酸氧化酶的產量。首先,單因素優化實驗表明pH、甘油濃度、酵母粉濃度、胰蛋白胨濃度分別為pH7、0.3%、1.2%、0.6%時有利于重組大腸桿菌表達丙酮酸氧化酶。進而,利用Box-Behnken法對甘油、酵母粉、胰蛋白胨設計三因素三水平實驗,通過響應面回歸分析,得到模型預測的最優培養基條件。在0.6%甘油、3.18%酵母粉和0.44%胰蛋白胨的培養基條件下重組大腸桿菌產丙酮酸氧化酶有最高活力。驗證試驗結果丙酮酸氧化酶活力達到(17194.9±504.9)U/L,與模型的預測值相近,比未優化前提高了1.7倍。本研究結果為丙酮酸氧化酶的大規模生產和工業化應用提供了基礎。
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