牛FOXM1基因特異性siRNA干擾效率的分析
作者：王超; 張淑琴; 宋雪瑩; 王改麗; 孫娜; 郭利; 程世鵬 中國農業科學院特產研究所/農業部經濟動物疫病重點實驗室/特種動物分子生物學重點實驗室; 長春130112; 黑龍江省農業科學院畜牧獸醫分院; 黑龍江齊齊哈爾160006; 吉林省畜牧獸醫科學研究院; 長春130062
摘要：為了篩選到有效干擾牛叉頭框M1(forkhead box M1,FOXM1)基因特異性siRNA,試驗設計并合成3個靶向干擾牛FOXM1的5-羧基熒光素(FAM)標記siRNA,對siRNA轉染劑量進行優化,篩選出干擾效果較好的siRNA,并檢測干擾FOXM1后MDBK細胞中LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的表達水平。結果表明:siRNA的最佳轉染劑量為1.5μL(20μmol/L),3個特異性siRNA的干擾效率分別為34.2%、52.0%及72.5%,干擾牛FOXM1基因效果最好的siRNA是siRNA-929,它能夠阻止細胞中LC3-Ⅰ型向LC3-Ⅱ型的轉化,使自噬過程受到抑制。說明試驗成功篩選到干擾牛FOXM1基因的特異性siRNA。
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