摘要:為探索植物呼吸爆發氧化酶(respiratory burst oxidase homologue,Rboh)基因家族在共生固氮中的功能和作用機制,利用分子生物學、細胞生物學和遺傳學等方法,圍繞百脈根Rboh基因家族中在根瘤中特異性表達的基因LjRbohA(Lj5g3v1497840)以及在根瘤中高表達的基因LjRbohB(Lj6g3v1549190)和LjRbohC(Lj5g3v1497820),分別對其蛋白的亞細胞定位、基因的表達模式、基因的啟動子活性及蛋白的功能進行了研究。結果顯示:LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC蛋白都定位在植物的細胞膜上;LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC基因在接種根瘤菌后表達上調;LjRobhA和LjRobhB基因在根瘤、維管束和側根原基表達;利用CRISPR-Cas9技術對LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC 3個基因分別進行敲除導致結瘤數目減少。這些研究結果表明,LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC這3個基因可能都參與調控百脈根與根瘤菌的共生結瘤過程。
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