摘要:目的 建立一種適合現場使用、靈敏、特異的腦膜炎奈瑟菌(N.men)檢測方法。 方法 針對N.men的ctrA基因設計環介導等溫擴增(LAMP)特異性引物和核酸侵入反應探針,對LAMP擴增產物進行核酸級聯侵入反應和納米金顆粒探針雜交檢測。優化反應體系和反應條件后進行敏感性和特異性實驗,并與Real-Time PCR檢測方法進行比較。 結果 以核酸級聯侵入反應和納米金顆粒探針顯色技術檢測LAMP擴增產物和毛細管電泳法具有相同的敏感性和特異性;LAMP結合核酸級聯侵入反應和納米金探針顯色技術的檢測敏感性為10 copies DNA分子/反應,且與其他病原體之間無交叉反應。在臨床樣本檢測方面,LAMP結合核酸級聯侵入反應和納米金探針顯色技術與Real-Time PCR檢測效果相當。 結論 結合LAMP、核酸級聯侵入反應和納米金探針顯色技術建立的N.men檢測方法靈敏、特異,無需特殊儀器,適用于基層檢測和現場快速檢測。
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