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BpMYB4基因在白樺中的遺傳轉化及低溫脅迫應答反應

作者:張宇; 陳肅; 高源; 黃海嬌 東北林業大學; 林木遺傳育種國家重點實驗室; 黑龍江哈爾濱150040

摘要:【目的】為了研究Bp MYB4基因在冷脅迫反應中的功能,對其進行了白樺轉化試驗。【方法】采用定量PCR技術對Bp MYB4基因在白樺的根、莖、葉、木質部、芽、莖段等18個組織部位的表達模式進行分析,然后克隆構建PGWB2-Bp MYB4植物過表達載體,通過農桿菌介導法進行白樺合子胚的遺傳轉化,采用PCR和熒光定量PCR技術檢測轉基因白樺株系中Bp MYB4基因的相對表達量,最后采用分光光度計法對Bp MYB4轉基因白樺進行了8項生理指標的測定。【結果】相對于芽的表達量,Bp MYB4基因在第3片葉的葉脈和第1片葉與第2片葉之間嫩莖的表達量最高;白樺的遺傳轉化總共獲得了13個過表達株系,且Bp MYB4基因已經成功整合到白樺基因組上,定量結果發現MYB-8、MYB-11、MYB-12轉基因白樺中Bp MYB4基因的表達量相對于非轉基因對照株系(NT)上調幅度最大;在低溫脅迫下,過量表達Bp MYB4基因提高了白樺的超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化物酶(POD)活性、花青素(OPC)含量、過氧化氫酶活性(CAT)、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和脯氨酸(PRO)含量,同時降低了轉基因白樺的丙二醛(MDA)的含量。【結論】Bp MYB4轉基因白樺在低溫脅迫下能夠產生具有保護作用的物質,具有一定的抵抗低溫的能力,因此,可以將其培育成抗凍優選株系。

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南京林業大學學報·自然科學版

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