摘要:利用多重光譜技術(熒光光譜、同步熒光光譜、紫外-可見光譜、傅里葉變換紅外光譜)研究VD3與大豆分離蛋白的相互作用。結果表明:VD3能對大豆分離蛋白的內源熒光進行靜態猝滅。VD3與大豆分離蛋白在不同溫度下相互作用的表觀結合常數分別為1.245×10^4(293 K)、1.250×10^4(298 K)、3.531×10^4(306 K)L/mol,對應的結合位點數分別為0.9733、0.9924和1.0942;結合距離r=2.92,其結合時通過非輻射能力轉移而促使蛋白質熒光猝滅。熱力學數據分析結果表明:VD3與大豆分離蛋白的反應是自發的吸熱過程,其相互作用的主要作用力是靜電相互作用和疏水相互作用。同步熒光光譜和紫外-可見光譜結果顯示,VD3的添加使大豆分離蛋白構象發生改變,芳香氨基酸殘基的微環境由疏水性向親水性變化。傅里葉變換紅外光譜結果表明VD3引起大豆分離蛋白的二級結構發生改變。
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