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谷氨酰胺轉氨酶在Yarrowia lipolytica中的活性表達

作者:任蕊蕊; 劉松; 李江華; 堵國成; 陳堅 江南大學生物工程學院; 無錫214122; 江南大學工業生物技術教育部重點實驗室; 無錫214122

摘要:谷氨酰胺轉氨酶(EC2.3.2.13, Transglutaminase, TGase)是一種重要的食品酶?;贜-端酶原區對折疊的重要影響,TGase通常以無活性的酶原(pro-TGase)形式在異源宿主中表達。以茂源鏈霉菌( Streptomyces mobaraensis )pro-TGase為基因來源,重組解脂耶氏酵母( Yarrowia lipolytica po1h)為研究對象,通過在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶識別位點(策略1)和共表達pro-TGase與谷氨酰胺轉氨酶激活金屬蛋白酶(TAMEP,策略2),使pro-TGase在 Y. lipolytica 中表達后被切除酶原區,而直接轉化為活性TGase。搖瓶發酵結果顯示,策略1和策略2構建得到的重組菌的TGase活力分別為5.26 U/mL和6.77 U/mL。酶學性質研究表明,策略1和策略2得到的重組菌的TGase比酶活、 Km及k cat / Km 均明顯優于 S. mobaraensis TGase?;?Y. lipolytica 食品安全性,研究結果為TGase的工業化生產提供了新型高產菌種。

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生物學

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