基于單個B細胞抗O型口蹄疫病毒單克隆抗體的研制
作者：張雨; 秦曉東; 朱學亮; 殷相平; 李彥敏; 張志東 中國農業科學院蘭州獸醫研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室; 甘肅蘭州730046
摘要：為了建立基于單個B細胞制備抗體技術,本研究以O型滅活FMDV為抗原,采集健康C57/BL小鼠脾細胞,經過磁珠富集、流式B220+/CD38+/Ig G1+/抗原+分選,獲得單個抗原特異性的B細胞。經單細胞巢式PCR反應擴增獲得抗體完整輕、重鏈可變區序列后,分別構建輕/重鏈表達質粒,然后共轉染HEK-293細胞后,成功獲得3株特異性單克隆抗體,且證明均屬于Ig G1型抗體;ELISA結果顯示,獲得的3株抗體均能與O型FMDV抗原結合;免疫熒光試驗證明,3株抗體能夠特異性結合細胞內復制的O型FMDV。本研究成功建立了基于單個B細胞直接制備抗FMDV單抗的方法,為后期開發特異性單克隆抗體打下了堅實的基礎。
注：因版權方要求，不能公開全文，如需全文，請咨詢雜志社
相關熱門期刊
