摘要：干擾素(interfern,IFN)是在特定的誘生劑作用下,由細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有高度生物活性的糖蛋白,具有廣譜抗病毒活性。從江香豬源Ι型干擾素α2和Ⅱ型干擾素γ于生菜中融合表達(dá)及生物活性研究未見(jiàn)報(bào)道。本研究應(yīng)用生菜植物表達(dá)系統(tǒng),將從江香豬源干擾素植物表達(dá)載體PBI121-IFNα2、PBI121-IFNα2γ、PBI121-IFNγ、PBI121-Vec轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌LBA4404中,用真空滲透法將攜帶干擾素質(zhì)粒的根癌農(nóng)桿菌感染生菜葉片;用β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)染色和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)從江香豬源干擾素在生菜葉片中的表達(dá);用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,Q-PCR)技術(shù)分析從江香豬源干擾素蛋白活性。結(jié)果顯示:GUS染色和ELISA檢測(cè)證明從江香豬源IFNα2、IFNα2γ、IFNγ在生菜中實(shí)現(xiàn)了表達(dá);Q-PCR檢測(cè)顯示:在Marc-145細(xì)胞上從江香豬源干擾素蛋白對(duì)PRRSV的復(fù)制有明顯抑制作用,在PK15細(xì)胞上從江香豬源干擾素蛋白對(duì)干擾素γ誘導(dǎo)蛋白30(interferon-gamma-inducible protein 30,IFI30)、2′-5′寡聚腺苷酸合成酶(2′-5′oligoadenylate synthetase,OAS)、抗黏液病毒蛋白(myxovirus resistance,MX)基因的mRNA水平的上調(diào)有一定的促進(jìn)作用。本研究成功實(shí)現(xiàn)從江香豬源IFNα2、IFNα2γ、IFNγ在生菜中進(jìn)行表達(dá)且表達(dá)蛋白具有生物學(xué)活性,為從江香豬源Ι型和Ⅱ型干擾素新復(fù)合型藥物植物蛋白的開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。